2017年初级西药师考试知识点:巨噬细胞
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导语:巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。我们一起来看看相关的考试知识吧。
单核细胞及由单核细胞演变而来的.具有吞噬功能的巨噬细胞,称为单核吞噬细胞系统。单核细胞发生于骨髓的多能干细胞,循环于血液中,穿透血管内皮进入组织内,转变为巨噬细胞。单核吞噬细胞系统在体内分布广,细胞数量多,主要分布于疏松结缔组织、肝、脾、淋巴结、骨髓、脑、肺以及腹膜等处,并依其所在组织的不同而有不同的名称。
单核吞噬细胞系统的细胞有很强的吞噬能力,能吞噬异物、细菌、衰老和突变的细胞等。此外,也吞噬抗原抗体复合物,并参与脂质与胆固醇代谢,可吞噬和蓄积脂质。吞噬的生理意义在于消除体内不需要的物质,其中巨噬细胞与淋巴细胞、粒细胞、肥大细胞,在功能上,有互相促进和互相抑制的作用。当单核吞噬细胞系的生理功能失调时,可引起多种疾病。
培养方法
巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P338D1、S774A.1、RAW309Cr.l等,均获恶性,培养中呈巨噬细胞形态和吞噬功能,易于传代和瓶壁分离,但难以建株。培养巨噬细胞可用各样方法和各种来源来获取细胞,以小鼠腹腔取材法最为实用,其法如下:
1、实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤1ml(勿注入肠内)。
2、引颈杀死动物,手提鼠尾将全鼠浸入70%酒精中3~5秒。
3、置动物于解剖台上,用针头固定四肢,双手持镊撕开皮肤拉向两侧,暴露出腹膜,但勿伤及腹膜壁。
4、再用70%酒精擦洗腹膜壁后,用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中,同时从两侧用手指揉压腹膜壁,令液体在腹腔内充分流动。
5、用针头轻轻挑起腹壁,使动物体微倾向一侧,使腹腔中液体集于针头下吸取入针管内。
6、小心拔出针头,把液体注入离心管中,250g4℃离心10分钟,去上清,加10mlEagle培养基。
7、计数细胞,每只小鼠可产生20~30×105细胞,其中90%为巨噬细胞。
8、为获取3×105帖附细胞/平方厘米,需接种2.5×106/ml。
9、为纯化培养细胞,去除其它白细胞,接种数小时后,去除培养液,用Eagle液冲洗1~2次后,再加新Eagle培养液置37℃,5%CO2温箱中培养。
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